乙肝病毒耐药位点检测和基因分型

??????? 全球至少有3.5亿人携带乙型肝炎病毒(HBV),其中3000万慢性乙肝患者在中国。乙型肝炎不仅可以导致肝硬化,而且是肝癌的原发病因。
??????? 口服核苷(酸)类似物在慢性乙型肝炎治疗中,“有效性”、“可行性”、“安全性”已广为临床所接受,但治疗过程中所出现的“耐药性”已成为影响其长期抗病毒治疗的最大临床问题之一。HBV 对核苷酸类药物耐药性的产生多与HBV P基因区变异有关,并且HBV P基因区变异是多位点的(见表一)。因此及时监测HBV变异水平,对于指导临床合理用药,具有重要参考价值。
表一:HBV DNA聚合酶10个耐药位点突变检测
药物相关耐药突变
拉米夫定L180M M204V A181T
恩替卡韦I169T L180M T184G S202I M204V/I M250V
恩曲他滨L180M M204V/I
替诺福韦A194T
替比夫定L180M M204V/I
阿德福韦A181V/T N236T
拉米夫定和恩曲他滨V173L
一、标本要求:2 ml 血清,采血后立即分离血清,-20℃保存运输。
二、检测技术:测序
三、检测时间:收到检测样本后5至7个工作日发出报告。
HCV定量分型检测

??????? 丙型肝炎病毒(HCV)是单股正链RNA病毒,1989年经分子克隆方法发现。HCV病毒呈球形,直径小于80 nm,在核衣壳外包绕脂质的囊膜,囊膜上有刺突,1991年,国际病毒分类讲HCV归类于黄病毒科。
365体育投注手机注册365体育投注地址365bet手机官网 ??????? HCV-RNA基因组全长不如HBC-DNA病毒稳定,HCV具有显着异源性和高度可变性,对已知全部基因组序列的HCV株进行分析比较其核苷酸和氨基酸序列存在较大差异。并表现HCV基因组各部位的变异程度不相一致,C区最保守、非结构(NS)区次之,编码囊膜蛋白E2/NS1可变性最高称为高可变区。第二届HCV与相关病毒国际讨论会议上,制定了HCV统一的命名系统,即Simmonds系统,根据病毒基因组核苷酸序列的同源型,依据发现的先后顺序以阿拉伯数字对其进行编号,同一基因型中的不同亚型按其发现的先后顺序已小写英文字母对其进行标记。至今主要分为6种HCV基因型和多种亚型。选用NS5B区PCR扩展后进行树结构分析是目前公认的基因分型“黄金标准”。
??????? HCV主要胃肠外途径传播,包括输血及血制品、注射、性接触、母婴传播等,其中输血是最主要的传染方式。全球HCV感染率为0.5%- 4%,中国一般人群感染率为1%—3%。目前抗-HCV检测是临床应用最为广泛的诊断指标,但抗-HCV的检测只是表现机体对HCV感染的免疫反映状态,只能间接提供HCV感染的依据,再加上抗原、抗体的变异,较长的“窗口期”等多种因素的存在,因此,对于输血安全,单纯抗原或抗体血清学检测已经不是最可靠的方法。血清HCV-RNA阳性是HCV感染的直接依据,荧光定量PCR成为基因诊断在临床应用的最为成熟的技术之一,具有高灵敏度、高特异性,可精确的检测血清中HCV的载量,对临床的诊断和治疗具有积极的指导作用。
项目检测技术样本要求检测时间
丙肝病毒RNA定量荧光定量PCR2 ml 血清,采血后立即分离血清,-20℃保存运输。1个工作日
丙肝病毒分型测序2 ml 血清,采血后立即分离血清,-20℃保存运输。5至7个工作日